北京索萊寶科技
專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：紫外分光光度法
更新時間：2024-07-08
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1736
010-50973130
產品分類
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胰蛋白酶測試盒
貨號：BC2310
規格：50管/48樣
檢測方法：可見分光光度法
測定意義：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創傷性損傷等所產生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
測定原理：
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰蛋白酶的活性。
自備儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
一、 粗酶液提取：
稱取約 0.1g 樣品，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿，10000 rpm 4℃離心 10min，取上清液，即粗酶液，置冰上待測。或者直接稱取 1mg 酶粉，加 1mL 提取液，充分混勻后置冰上待測（為保證實驗的準確性建議梯度稀釋）。
二、 測定：
1. 分光光度計預熱 30 min 以上，調節波長到 253 nm，蒸餾水調零。
2. 工作液的配制：將試劑一與試劑二按 2:97 配置工作液，按需配制，并置于 37℃水浴預熱 30min以上。
3. 空白管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 蒸餾水，混勻，迅速于 253nm測定 0s 和 60s 的吸光度，記為△A 空白。
4. 測定管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 粗酶液，混勻，迅速于 253nm測定 0s 和 60s 的吸光度，記為△A 測定。
三、 胰蛋白酶活性計算：
1.按蛋白濃度計算：
活性單位（U）定義：在 1mL 體系下，37℃每毫克蛋白質每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測定-△A 空白) ÷0.001÷（Cpr×V1）÷T
=100000×(△A 測定-△A 空白) ÷Cpr2.按樣本鮮重計算：
活性單位（U）定義：在 1mL 體系下，37℃每克組織每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測定-△A 空白) ÷0.001÷（W×V1÷V2）÷T
=100000×(△A 測定-△A 空白) ÷W
Cpr：粗酶液蛋白質濃度（mg/mL），需要另外測定；W：組織質量（g）；V1：加入反應體系中粗酶液體積（mL），10μL=0.01 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；T：反應時間（min），1min。
實驗前用 1～2 個樣做預實驗，保證吸光值變化在 0.01～0. 15 之間。
胰蛋白酶測試盒訂購說明：
1、絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。
2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運輸說明：
1、極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品：常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。
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