堿性蛋白酶(AKP)活性檢測試劑盒
貨號：BC2305
規格：100管/48樣
檢測方法：微量法
在堿性條件下，AKP水解酪蛋白生成酪/酸；在堿性條件下，酪/酸還原磷鉬酸生成鎢藍；鎢藍在680nm有特征吸收峰，測定680nm吸光度增加速率，來計算AKP活性。

產品型號：BC2305-100T/48S

更新時間：2024-07-08

廠商性質：生產廠家

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PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質羥自由基清除能力檢測植物銨態氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

產品介紹

堿性蛋白酶（AKP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2305
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液	液體55mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1瓶	2-8℃保存
試劑三	液體20mL×1瓶	2-8℃保存
試劑四	液體4mL×1瓶	2-8℃保存
標準品	液體1mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑一：臨用前加入4mL蒸餾水，充分溶解；2-8℃保存8周。
試劑二：臨用前取1瓶加入4mL提取液，沸水浴中攪拌溶解；2-8℃保存8周。
標準品：20μmol/mL標準酪/酸。

產品說明：
AKP是指在堿性條件下催化蛋白質肽鍵水解的酶類，屬于絲*酸蛋白酶。此外，該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵，具有轉酯及轉肽的功能。該酶是主要工業用酶之一，廣泛應用于制藥、絲綢、食品、制革等行業。
在堿性條件下，AKP水解酪蛋白生成酪/酸；在堿性條件下，酪/酸還原磷鉬酸生成鎢藍；鎢藍在680nm有特征吸收峰，測定680nm吸光度增加速率，來計算AKP活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
研缽/勻漿器、臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1.5 mL EP管和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
稱約0.1g組織，加入1mL提取液，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待測。或直接稱取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待測。
二、測定步驟

分光光度計/酶標儀預熱30min 以上，調節波長至680nm，蒸餾水調零。
試劑一、試劑二和試劑三置于40℃水浴保溫30min以上。
標準溶液的配制：臨用前將20μmol/mL標準液用蒸餾水稀釋80倍至0.25μmol/mL 標準溶液使用，現用現配。

樣本測定：(1.5mLEP管中分別加入下列試劑)

試劑名稱（µL）	對照管	測定管	空白管	標準管
粗酶液	20	20	-	-
試劑一	40	-
試劑二	-	40
混勻后40℃水浴保溫10min
試劑一	-	40
試劑二	40	-
混勻后10000rpm 4℃離心10min，取上清
上清	40	40	-	-
蒸餾水	-	-	40	-
標準品	-	-	-	40
試劑三	200	200	200	200
試劑四	40	40	40	40
混勻后40℃水浴保溫20min

取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板，于680nm測定光吸收，分別記為A對照管、A測定管、A空白管、A標準管。
并計算ΔA測定=A測定管-A對照管、ΔA標準=A標準管-A空白管。空白管和標準管只需做1-2次

注意事項：
若反應較弱，（A測定管-A對照管）差值較小，可適當延長反應時間（20-30min），即第一步水浴時間，最后計算酶活時對公式進行修改。
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