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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC1080-50T/48S
更新時間：2024-07-09
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1763
010-50973130
產品分類
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乙醇脫氫酶（ADH）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1080
規格：50T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 粉劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體45mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
| 試劑三 | 液體6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
提取液：臨用前將粉劑一倒入提取液中，溶液為懸濁液，使用前需搖勻；
試劑二：臨用取一支加入1.5mL蒸餾水，-20℃分裝保存4周，避免反復凍融。
產品說明：
ADH是生物體內短鏈醇代謝的關鍵酶，催化乙醇與乙醛可逆轉換，在很多生理過程中起著重要作用。哺乳動物ADH主要在肝臟生成，肝臟損傷導致ADH釋放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否異常。
ADH催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+，NADH在340nm處有吸收峰，而NAD+沒有；測定340nm 吸光度下降速率，來計算ADH活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、水浴鍋、可調式移液器、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
實驗實例：
取0.1g大鼠肝臟按照提取和測定步驟操作，測得計算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001，ΔA測定管=A3-A4=0.812-0.587=0.225，按樣本質量計算酶活得：
ADH (U/g 質量) =1.61×(ΔA測定管–ΔA空白管)÷W=1.61×(0.225–0.001)÷0.1=3.6064U/g 質量。
取小鼠血漿直接檢測，測得計算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001，ΔA測定管=A3-A4=0.708-0.676=0.032，按液體體積計算酶活得：
ADH (U/mL) =1.61×(ΔA測定管–ΔA空白管)=1.61×(0.032–0.001)=0.04991 U/mL。
注意事項：
若A3大于1.5或者A3小于A1，則需要將樣本用蒸餾水稀釋再進行測定，計算公式注意乘以稀釋倍數。
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