儲存條件
2-8℃
中文名稱
植物組織果糖含量測試盒糖代謝
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Plant Tissue Fructose Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC2450-50T/48S

更新時間：2024-07-09

廠商性質：生產(chǎn)廠家

訪問量：2345

服務熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

酰基轉移酶（AAT）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2350
規(guī)格：10T/9S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體15 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體10 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×1支	-20℃保存
試劑三	液體1.5 mL×1支	2-8℃保存
試劑四	液體1mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

提取液：內含不溶物，使用前搖勻；
試劑二：臨用前加蒸餾水1mL充分溶解，未用完的試劑2-8℃可以保存2周；

產(chǎn)品說明：
AAT是一個多功能蛋白大家族，主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應，在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。

AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇，同時還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測定412nm吸光度增加速率，來計算AAT活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1、組織樣本：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。4℃，15000 g離心20min，取上清液待測。
2、血清（漿）樣本：直接檢測。（若液體有渾濁則離心后進行測定）
二、測定步驟

分光光度計預熱30min 以上，調節(jié)波長至412nm，蒸餾水調零。
試劑一在37℃水浴保溫20min以上。
樣本測定：

試劑名稱（μL）	空白管	測定管
蒸餾水	100	-
上清液	-	100
試劑一（預熱）	700	700
試劑二	50	50
試劑三	100	100
試劑四	50	50

將上述試劑按順序加入1mL 玻璃比色皿中，加試劑四的同時開始計時，充分吹打混勻，在412nm波長下記錄第10s時的初始吸光度A1和130s后的吸光值A2，計算ΔA空=A2空-A1空、ΔA測=A2測-A1測、ΔA=ΔA測-ΔA空。空白只需做1-2次。
三、AAT活性計算
1、按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：37℃中每mL反應體系下每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/mg prot) =ΔA÷0.001÷(Cpr×V樣) ÷T= 5000×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。
2、按樣本質量計算
單位的定義：37℃中每mL反應體系下每克組織每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/g 質量) =ΔA÷0.001÷(V樣÷V樣總×W) ÷T=5000×ΔA÷W
3、按血清體積計算
單位的定義：37℃中每mL反應體系下每mL血清每分鐘催化吸光值變化0.001個單位為1個酶活單位。
AAT (U/mL 血清) =ΔA÷0.001÷V樣÷T=5000×ΔA
Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL，需要另外測定；V樣：加入反應體系中上清液體積，0.1mL；W：樣本質量，g；V樣總：提取液體積，1mL；T：反應時間，2min。
注意事項：

當吸光值大于1時，建議稀釋后測量。
如果ΔA測小于0.01，可以延長反應時間，如測定10s和310s的吸光度，計算時相應修改計算公式中反應時間。

實驗實例：

取0.1g腎臟加入1mL提取液進行樣本處理，取上清后稀釋4倍后按測定步驟操作，測得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA測=A2測-A1測=0.665-0.479=0.186、ΔA=ΔA測-ΔA空=0.186-0.004=0.182，按樣本質量計算酶活得：AAT (U/g 質量) =5000×ΔA÷W×4（稀釋倍數(shù)）=36400 U/g 質量。
取兔血清直接按照測定步驟操作，測得ΔA空=A2空-A1空=0.105-0.101=0.004、ΔA測=A2測-A1測0.622-0.521=0.101、ΔA=ΔA測-ΔA空=0.101-0.004=0.097，按血清體積計算酶活得：AAT (U/mL 血清) =5000×ΔA=5000×0.097=485 U/mL 血清。