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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC0175-100T/48S
更新時間：2025-08-28
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：1898
010-50973130
產品分類
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超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0175
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體100 μL×1支 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 液體0.25mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：使用前先使用掌上離心機離心至管底再吹打混勻；
試劑二工作液：根據樣本數量按試劑二：蒸餾水=30μL：270μL（共300μL，約15S）的比例配制試劑二工作液，現用現配；
試劑四工作液：根據樣本量按試劑四：蒸餾水=60μL：240μL（共300μL，約30T）的比例配制試劑四工作液，現用現配。
產品說明：
SOD（EC 1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超氧化物陰離子發生歧化作用，生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。
通過黃*呤及黃*呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。血清或者SOD酶活小的樣本更適合使用BC5165超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測試劑盒（WST-1法）進行測定。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
樣本和試劑二工作液使用時在冰上放置。
樣本較多時，可按表格配制測定管工作液和對照管工作液（包含試劑一、（試劑二工作液）、試劑三、蒸餾水），試劑四工作液必須最后加入。
反應完成后，可能有沉淀生成，混勻后測定即可。
實驗實例：
取0.1g大鼠腎臟加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定= A測定-A對照=0.566-0.138=0.428，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.802-0.041=0.761，抑制百分率=(ΔA空白-ΔA測定) ÷ΔA空白×100%=43.8%，按樣本質量計算酶活得：
SOD活性（U/g 質量）=10×抑制百分率÷(1-抑制百分率) ÷W=77.94 U/g 質量。
取0.1g稗草葉片加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋4倍后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定= A測定-A對照=0.498-0.078=0.42，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.771-0.042=0.729，抑制百分率=(ΔA空白-ΔA測定) ÷ΔA空白×100%=42.4%，按樣本質量計算酶活得：
SOD活性（U/g 質量）=10×抑制百分率÷(1-抑制百分率) ÷W×4（稀釋倍數）=294.4U/g 質量。
取20μL羊血清蒸餾水稀釋50倍后直接按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定= A測定-A對照=0.467-0.049=0.418，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.771-0.042=0.729，抑制百分率=(ΔA空白-ΔA測定) ÷ΔA空白×100%=42.7%，按血清/血漿體積計算酶活得：
血清（漿）SOD活性（U/mL）=10×抑制百分率÷(1-抑制百分率) ×50（稀釋倍數）=372.6 U/mL。
取1000萬細胞加入1mL提取液，超聲破碎，離心取上清，直接按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定= A測定-A對照=0.52-0.058=0.462，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.802-0.04=0.762，抑制百分率=(ΔA空白-ΔA測定) ÷ΔA空白×100%=39.4%，按細胞/細菌數量計算酶活得：
SOD 活力（U/104 cell）=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V反總] ÷(1000×V樣÷V樣總)=0.0065 U/104 cell。
相關發表文獻：
Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang, et al. Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus). Food and Bioprocess Technology. April 2019;12: 563-574. (IF3.032)
Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng, et al. Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton. Environmental and Experimental Botany. June 2019; 162: 364-373. (IF3.712)
Yang Yang,Li Jing,Wei Cong, et al. Amelioration of nonalcoholic fatty liver disease by swertiamarin in fructose-fed mice. Phytomedicine. June 2019;59. (IF4.18)
Siyang Yu,Bo Dong,Zhenfei Fang,et al.Knockdown of lncRNA AK139328 alleviates myocardial ischaemia/reperfusion injury in diabetic mice via modulating miR-204-3p and inhibiting autophagy. Journal of Cellular and Molecular Medicine. July 2018;(IF4.658)
Qilong Wang, Guosheng Xiao, Guoliang Chen, et al. Toxic effect of microcystin-LR on blood vessel development. Toxicological & Environmental Chemistry. February 2019;(IF3.547)
參考文獻：
Spitz D R, Oberley L W. An assay for superoxide dismutase activity in mammalian tissue homogenates[J]. Analytical Biochemistry, 1989, 179(1):8-18.
Masayasu M, Hiroshi Y. A simplified assay method of superoxide dismutase activity for clinical use[J]. Clinica Chimica Acta, 1979, 92(3):337-342.
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